第一章
家蠶與家蠶轉基因
第一節 家蠶
第二節 家蠶轉基因
一、 家蠶轉基因的特點 /
二、 家蠶轉基因的早期研究 /
三、 家蠶轉基因研究現狀與發展 /
參考文獻
第二章
家蠶轉基因的載體構建
第一節 目的基因的獲得
一、 從基因組DNA文庫獲取目的基因 /
二、 從cDNA文庫獲取目的基因 /
三、 通過PCR技術分離目的基因 /
四、 利用電子克隆獲取目的基因 /
五、 人工合成目的基因 /
第二節 啟動子的選擇
一、 組成型啟動子 /
二、 誘導型啟動子 /
三、 組織特異性啟動子 /
四、 家蠶RNA聚合酶Ⅲ啟動子 /
第三節 標記基因
一、 熒光蛋白基因 /
二、 熒光素酶基因 /
三、 抗性篩選基因 /
四、 其他可視化標記基因 /
第四節 調控元件
一、 內含子 /
二、 增強子 /
三、 非翻譯區 /
四、 絕緣子 /
五、 其他調控元件 /
第五節 家蠶轉基因常用載體
一、 轉座載體 /
二、 基因打靶載體 /
三、 人工核酸酶表達載體 /
四、 其他類型載體 /
第六節 轉基因載體構建流程
一、 pSL-FibH-EGFP-LBS中間載體的構建 /
二、 piggyBac重組轉座載體的構建 /
參考文獻
第三章
家蠶外源基因導入技術
第一節 胚胎顯微注射技術
一、 家蠶胚胎顯微注射儀器的誕生與發展 /
二、 家蠶胚胎顯微注射操作流程 /
第二節 精子介導基因轉移技術
一、 家蠶精子介導轉基因技術的建立 /
二、 家蠶精子介導轉基因操作流程 /
第三節 其他外源基因導入技術
一、 電穿孔法 /
二、 壓力滲透法 /
三、 基因槍法 /
四、 病毒介導法 /
五、 脈沖場電泳法 /
參考文獻
第四章
轉基因家蠶的篩選與鑒定
第一節 轉基因家蠶的篩選
一、 熒光標記 /
二、 顯性顏色變化標記 /
三、 其他表型變化識別標記 /
第二節 外源基因的整合與表達分析
一、 外源基因的整合分析 /
二、 外源基因的表達分析 /
第三節 外源基因表達產物的生物活性及功能檢測
一、 表達產物的生物活性分析 /
二、 表達產物的功能測試 /
第四節 內源基因定點突變家蠶的鑒定
一、 T7E1酶切鑒定內源基因定點突變家蠶 /
二、 其他鑒定突變個體的核酸內切酶 /
三、 限制性內切酶酶切檢測法 /
參考文獻