目  錄

第一篇 理論篇

  一、中藥資源轉錄組概述

    (一)轉錄組的研究目標

    (二)轉錄組的研究方法

    (三)中藥資源轉錄組研究現狀

    (四)中藥資源轉錄組研究展望

  二、同源基因功能分化與活性成分變異機制

    (一)同源基因的正確注釋是研究藥用植物活性成分

  變異的重要前提

    (二)重復基因的功能分化是形成藥用植物活性成分

  變異的基礎

    (三)藥用植物基因功能分化決定其活性成分的變異

  三、功能性EST—SSR標記

    (一)功能性EST～SSR的基本概念

    (二)功能性EST—SSR的開發流程

    (三)功能EST—SSR的優勢

    (四)功能性EST—SSR標記在中藥資源中的應用

    (五)藥用植物功能性EST—SSR標記展望

第二篇 技術篇

  一、轉錄組數據的組裝

  實驗一樣品收集與保存

  實驗二RNA提取

  實驗三mRNA分離純化

  實驗四Solexa文庫制備

  實驗五上機測序

  實驗六轉錄組數據組裝

  實驗七轉錄組數據功能注釋

  二、基因克隆及表達分析

  實驗八基因克隆

  實驗九基因表達分析

  實驗十共表達分析

  三、數據庫使用及生物信息學分析

  實驗十一核酸數據庫及其使用

  實驗十二蛋白質數據庫及其使用

  實驗十三代謝數據庫及其使用

  實驗十四文獻數據庫及其使用

  實驗十五NCBI序列數據的提交

  實驗十六多序列對位排列分析

  實驗十七系統發育分析

  實驗十八核酸序列的分析和轉換

  實驗十九基因開放閱讀框預測

  實驗二十蛋白質理化性質預測

  實驗二十一蛋白質亞細胞定位信號預測

  實驗二十二蛋白質信號肽和跨膜結構域預測

  實驗二十三蛋白質二級結構和三級結構預測

  四、SSR標記開發

  實驗二十四SSR位點開發

  實驗二十五SSR引物設計

  實驗二十六基因組DNA提取

  實驗二十七瓊脂糖凝膠電泳

  實驗二十八非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳

  實驗二十九SSR數據統計

  實驗三十SSR數據分析